1、取材 新鲜的小型脊椎动物，如鱼、蛙等，长度在10～20厘米，以活体为好。
2、固定。材料洗干净。如果是鱼，应该先去鳞，再洗净。然后，放入95％乙醇中固定1～2天。如果材料已经用5～10％甲醛液保存过，则要用清水漂洗后再浸在95％乙醇中，使它充分固定。
3、去皮 用解剖器剥去小动物的外皮。
4、脱脂。把去皮后的标本用绳缚在玻璃片上，整理好姿势，浸在3%重铬酸钾溶液中几天，除去材料表面的脏物和脂肪粒块。当溶液变混浊时，更换新液，直到溶液不混浊为止。取出标本，用清水洗干净，再浸入95%乙醇中脱脂一周左右。
5、透明 标本转入20%氢氧化钾溶液中。一周左右，见肌肉呈半透明状态，里面骨骼隐约可见，即终止透明。
6、染色 把透明后的标本浸入0.01%茜素红染液中2～3天，到骨骼染上红色为止。
