铁皮石斛种子往往需要三个培养阶段才能形成可以移栽的幼苗,分别为种子萌发形成原球茎、原球茎诱导丛生芽、壮苗生根培养这三个阶段,每个阶段所需的营养条件各不相同,培养基的不同配方是组培关键技术所在。
首先,在无菌条件下,将铁皮石斛的蒴果消毒切开,将里面的种子播种于合适的种子萌发培养基中,待其生长两个月左右,种子萌发成原球茎,然后将原球茎转接到诱导丛生芽的培养基中,生长两到三个月,原球茎逐渐长成无根或只有少量不定根的小苗,再将这些小苗转接到壮苗生根培养基中,生长两到三个月,即可形成可以移栽的幼苗。
每个阶段都很关键,一个环节掌握不好,将可能导致苗的生产周期长、成本高、品种变异系数大、苗移栽到大田后成活率低等;组培苗的生长还需要合适的环境,培养温度、湿度、光照强度等等这些因素也是组培苗生长好坏的决定因素,培养温度要适中,一般控制在25℃~27℃之间,湿度在60%—75%之间,光照使用荧光灯,近似太阳光,用的是光照度适中的节能灯,幼苗的生长很脆弱,除了从培养基中吸收营养以外,还必须要有光照来进行光合作用来合成自己所需营养,光照一般为12~13个小时/天。