于和伟在读初中时喜欢唱歌，在校期间，学习一般的他第一年中考成绩并不理想。因为不想做待业青年，决定补习一年再考。于和伟两次中考后，成绩还是不理想，恰好当时抚顺市幼儿师范学校第一年招男生，毕业后可以去小学当音乐老师。在补习班老师的建议下，进了抚顺幼儿师范学校学音乐。毕业后，因为爱好文艺，后来考进了抚顺话剧团。1992年，于和伟考入了上海戏剧学院。
演艺经历
1999年，于和伟参演个人首部电视剧《曹操》，从而正式进入演艺圈。2003年，参演高希希执导的抗战剧《历史的天空》。2004年，在情感剧《搭错车》中饰演苏民生。2009年，在古装剧《三国》中饰演刘备。2011年，搭档主演电视剧《青盲》。2011年，凭借电视剧《幸福在路上》获得南方盛典最佳男演员奖。2012年5月22日，获得MSN星月年度最具价值男演员奖。2014年，主演都市情感剧《下一站婚姻》，并凭借该剧获得第17届华鼎奖当代题材最佳男演员奖。
2015年8月9日，凭借电视剧《下一站婚姻》获得第17届华鼎奖最佳男演员奖。2017年9月16日，凭借电影《我不是潘金莲》获得第31届中国电影金鸡奖最佳男配角。2018年，于和伟凭借《大军师司马懿之军师联盟》获得第24届上海电视节“白玉兰奖”最佳男配角。2019年9月10日，主演的电视剧《人民的正义》开机;同年，获得第十七届电影表演艺术学会奖。
社会活动
2014年12月，于和伟参加“天使的微笑”共将爱传递慈善摄影展。2015年1月，参与爱心公益接力，呼吁大家传递文明新风;9月，赴四川大凉山实地探访当地缺水状况，带领探访队员们进行高海拔“无水挑战”、为缺水家庭背水，并在微博上实时分享感悟，号召大家节约用水，为山区的同胞们伸出援助之手;12月29日，参与“母亲水窖爱聚15年”公益晚会，并被授予“母亲水窖宣传大使”称号。
2016年1月21日，获得第五届中国公益节年度公益人物奖;7月，于和伟在辽宁省抚顺市捐建了两座蒲公英儿童图书馆。
个人评价
于和伟在拍戏时特别认真和钻研，对艺术一丝不苟。他演技精湛，虽然小鼻子小眼睛的，却让人有种很信任的感觉。(王丽坤、搜狐娱乐评)
在电视剧《三国》中他充分演出了君王刘备稳重和睿智的特点。他的荧屏形象丰富而出彩，无论出演的是主角或是配角、正派还是反派、古装抑或现代，都让观众看到了他演技更多的精彩一面。(高希希、新浪娱乐评)
在电视剧《搜索连》中，他饰演的角色打破了以往脸谱化的军人形象，既彰显了军人硬汉气质的帅气一面，性格中也不乏风流不羁，偶尔还会冒出点小幽默。这种形象在神经紧绷的抗战戏中体现了难得的喜剧效果，同时，也让人物形象更加立体真实。(搜狐娱乐评)
