专利名称：一种具有美白祛斑换肤作用的组合物的制作方法
技术领域：
本发明属于治疗性化妆技术及生物医药领域，具体涉及用于美白祛斑换肤的外用化妆品或药品，即一种天然来源的银杏黄酮、芝麻素与黄芪总苷组合物。
背景技术：
随着人们对美的不断追求和健康意识的增强，药妆已成为一种潮流和化妆品市场蓬勃发展的新生力量。欧洲某权威机构历时6年，抽样调查25-60岁的中国女性数千名，进行“中国人皮肤类型学”研究表明，与欧洲女性相比，中国女性在皮肤老化过程中，首先表现出来的是色斑问题，随着年龄的增长而增加。据我国知名博雅美容化妆品咨询机构统计数
据，以“ 2011年中国人口及人口结构统计公报”、“ 2011年消费行为与生产形态年鉴”和“美容化妆品业咨询机构”统计数据为测算依据，女性20-35岁，共15个年龄段人群中，40 %为祛斑美白消费群。人们对去除色斑、皮肤变白、减少皮肤松懈、皱纹、粗糙等有强烈的需求，中国祛斑美白用品的基本市场容量每年接近100亿元。银杏是我国珍贵的药用植物，银杏的叶、果和外种皮等皆具有药用开发价值。据《本草纲目》记载，银杏性甘、苦、平、涩；有定喘止咳、止带浊、止痛之功；主治寒嗽痰喘、哮喘、小便频数、赤白带下、手足皲裂等。特别是近几十年来人们发现银杏叶中含有多种有效成分，主要有效成分为黄酮类化合物，具有抗氧化、防治心脑血管疾病的功能。芝麻素是芝麻中的主要功能成分，分子式为C2tlH18O6，属于木脂素类；芝麻素具有消除体内自由基、降低血清胆固醇，保护肝功能，促进醇代谢，抗菌活性等多种生理活性功能。黄芪总苷是药食同源中药黄芪中的主要有效成分，具有延缓衰老、抗氧化、保肝、抗肿瘤等多种活性。银杏黄酮、芝麻素与黄芪总苷组合，可明显提高各自抗氧化的作用，具有协同增强生理活性的优势。未见银杏黄酮、芝麻素与黄芪总苷配伍用于美白祛斑换肤的用途的报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种具有美白祛斑换肤作用的组合物，可与用于化妆制剂或药物的赋形剂混合制成皮肤外用制剂，它具有美白祛斑换肤效果好，疗效显著、使用安全的特点。银杏叶中所含的银杏黄酮和银杏内酯是主要活性成分，其中银杏黄酮含量最高。芝麻中所含的芝麻素、芝麻林素、芝麻酚是主要活性成分，其中芝麻素含量最高。黄芪中含有皂苷、多糖、黄酮、氨基酸、酚类和微量元素等，其中皂苷和多糖为主要活性成分。本发明对银杏叶、芝麻柏、黄芪进行提取得到银杏黄酮粉末(有效部位)、芝麻素粉末(有效部位)和黄芪总苷粉末(有效部位)，按质量比1-10 : 1-10 : 1-10混合均匀得到美白祛斑换肤用组合物。最佳的质量比为I : I : I。银杏黄酮粉末中的银杏黄酮含量大于50% ;芝麻素粉末中的芝麻素含量大于50%;黄芪总苷粉末中的黄芪总苷含量大于50%。该组合物可以按公知的工艺加工成皮肤外用制剂，如膏霜乳液、凝胶、贴膜、皮下注射剂等。本发明的有益效果是，药理药效学试验研究表明，本发明具有抑制皮肤色素沉着、抑制黑素细胞增生，抑制黑素细胞酪氨酸酶活性和黑色素生成，并能明显地促进角质形成细胞的增殖和细胞凋亡；具有显著的美白祛斑换肤效果。局部刺激性实验研究表明本发明安全，无皮肤刺激、过敏等不良反应。临床试用结果表明，本发明对面色暗黄、面部色斑具有显著的防治作用，有效率达100%，使用安全无副作用。
具体实施例方式下面结合实施例，对本发明作进一步地描述。实施例I :一种具有美白祛斑换肤作用的组合物由从银杏叶中提取的银杏黄酮粉末、从芝麻柏中提取的芝麻素粉末和从黄芪中提取的黄芪总苷粉末，按质量比I : I : I混合均匀组成。银杏黄酮提取工艺如下将银杏叶粉碎，用70%乙醇加热回流提取，合并提取液，回收乙醇并浓缩至适量，加在已处理好的AB-8大孔吸附树脂上，依次用水及不同浓度的乙醇洗脱，收集相应的洗脱液，浓缩成浸膏，真空干燥，称重，得银杏黄酮粉末，并测定银杏黄酮的含量(mg/g)。本品性状为浅棕黄色粉末，无臭，味微苦，有吸湿性，溶于醇，不溶于水。银杏黄酮含量测定采用HPLC法进行测定。根据标样的保留时间进行定性，用外标法计算银杏黄酮的含量。本品银杏黄酮含量为502. 75mg/g。银杏黄酮提取工艺和含量测定方法为公知公用的方法。芝麻素提取工艺如下将芝麻研磨成粉末，加入约2倍体积的正己烷进行搅拌脱月旨，维时3h，过滤后再加入约2倍体积的正己烷进行第二次脱脂，维时3h，风干。准确称取一定量粉末，加入料液比I : 8. 5 (g/ml) 93%的乙醇，在水浴温度55°C下搅拌，提取时间2. 5h，重复提取一次。提取液过滤，将滤液在旋转蒸发仪上蒸出部分乙醇(剩余体积<25mL)，减压浓缩，并于60°C真空干燥，称重，得芝麻素粉末，并测定芝麻素的含量(mg/g)。本品性状为浅褐色粉末，无臭，无味，有吸湿性，溶于醇，不溶于水。芝麻素含量测定采用HPLC法进行测定。根据标样的保留时间进行定性，用外标法计算芝麻素的含量。本品芝麻素含量为636. 02mg/g。芝麻素提取工艺和含量测定方法为公知公用的方法。黄芪总苷制备工艺如下黄芪药材，切约O. 5cm厚的饮片，加70%乙醇回流提取2次，第一次加10倍量，提取90min ;第2次加8倍量，提取60min，合并70%乙醇提取液，过滤，滤液减压浓缩蒸尽乙醇，微热，加水至2000ml，放置12h，过滤，滤液用适量的DlOl大孔吸附树脂，吸附过的滤液弃去，继续用水冲洗吸附后的DlOl大孔吸附树脂，至洗液检不出还原糖为止,弃去水洗液,再用适量30%乙醇冲洗，弃去30%醇洗液，再用70%乙醇洗脱，至洗脱液检不出黄芪甲苷为止，减压浓缩70%乙醇洗脱液，并于60°C真空干燥，称重，得黄芪总苷粉末，并测定黄芪总苷的含量(mg/g)。本品性状为棕褐色粉末，无臭，味微苦，有吸湿性，溶于醇和水。黄芪总苷含量测定采用分光光度法测定波长为560nm，显色剂选用香草醛-高氯酸发色体系，从标准曲线上读出供试品溶液中相当于黄芪甲苷的量，求得黄芪总苷含量。本品黄芪总苷含量为577. 17mg/g。黄芪总苷制备工艺和含量测定方法为公知公用的方法。
霜剂的制备，按公知公用的霜剂制备工艺方法制备霜剂。每克含银杏黄酮+芝麻素 + 黄苗总苷为 lOOmg+lOOmg+lOOmg。实施例2 一种具有美白祛斑换肤作用的组合物由从银杏叶中提取的银杏黄酮粉末、从芝麻柏中提取的芝麻素粉末和从黄芪中提取的黄芪总苷粉末，按质量比2 I 2混合均匀组成。凝胶剂的制备，按公知公用的凝胶剂制备工艺方法制备凝胶剂。每克含银杏黄酮+芝麻素+黄苗总苷为200mg+100mg+200mg。其它同实施例I。实施例3 一种具有美白祛斑换肤作用的组合物由从银杏叶中提取的银杏黄酮粉末、从芝麻柏中提取的芝麻素粉末和从黄芪中提取的黄芪总苷粉末，按质量比I : 2 2混合均匀组成。乳液剂的制备，按公知公用的乳液剂制备工艺方法制备乳液剂。每克含银杏黄酮+芝麻素+黄苗总苷为100mg+200mg+200mg。其它同实施例I。实施例4 一种具有美白祛斑换肤作用的组合物由从银杏叶中提取的银杏黄酮粉末、从芝麻柏中提取的芝麻素粉末和从黄芪中提取的黄芪总苷粉末，按质量比5 2 2混合均匀组成。霜剂的制备，按公知公用的霜剂制备工艺方法制备霜剂。每克含银杏黄酮+芝麻素 + 黄苗总苷为 250mg+100mg+100mg。其它同实施例I。实施例5 一种具有美白祛斑换肤作用的组合物由从银杏叶中提取的银杏黄酮粉末、从芝麻柏中提取的芝麻素粉末和从黄芪中提取的黄芪总苷粉末，按质量比2 I 10混合均匀组成。乳液剂的制备，按公知公用的乳液剂制备工艺方法制备乳液。每克含银杏黄酮+芝麻素+黄苗总苷为40mg+20mg+200mg。其它同实施例I。实施例6 —种具有美白祛斑换肤作用的组合物由从银杏叶中提取的银杏黄酮粉末、从芝麻柏中提取的芝麻素粉末和从黄芪中提取的黄芪总苷粉末，按质量比10 5 I混合均匀组成。凝胶剂的制备，按公知公用的凝胶剂制备工艺方法制备凝胶。每克含银杏黄酮+芝麻素+黄苗总苷为200mg+100mg+20mg。其它同实施例I。实施例7 一种具有美白祛斑换肤作用的组合物由从银杏叶中提取的银杏黄酮粉末、从芝麻柏中提取的芝麻素粉末和从黄芪中提取的黄芪总苷粉末，按质量比I : 10 2混合均匀组成。凝胶剂的制备，按公知公用的凝胶剂制备工艺方法制备凝胶。每克含银杏黄酮+芝麻素+黄苗总苷为20mg+200mg+40mg。其它同实施例I。实施例8 一种具有美白祛斑换肤作用的组合物由从银杏叶中提取的银杏黄酮粉末、从芝麻柏中提取的芝麻素粉末和从黄芪中提取的黄芪总苷粉末，按质量比5 5 8混合均匀组成。霜剂的制备，按公知公用的霜剂制备工艺方法制备霜剂。每克含银杏黄酮+芝麻素+黄苗总苷为50mg+50mg+80mg。其它同实施例I。实施例9 一种具有美白祛斑换肤作用的组合物由从银杏叶中提取的银杏黄酮粉末、从芝麻柏中提取的芝麻素粉末和从黄芪中提取的黄芪总苷粉末，按质量比3 2 5混合均匀组成。贴膜剂的制备，按公知公用的贴膜剂制备工艺方法制备贴膜。每片含银杏黄酮+芝麻素+黄苗总苷为30mg+20mg+50mg。其它同实施例I。实施例10 一种具有美白祛斑换肤作用的组合物由从银杏叶中提取的银杏黄酮粉末、从芝麻柏中提取的芝麻素粉末和从黄芪中提取的黄芪总苷粉末，按质量比2 5 5混合均匀组成。皮下注射剂的制备，按公知公用的皮下注射剂制备工艺方法制备皮下注射剂。每毫升含银杏黄酮+芝麻素+黄苗总苷为20mg+50mg+50mg。其它同实施例I。用以上方法制成的外用制剂，进行相关的药理药效学试验、局部刺激性安全性评价实验和临床试用试验。下面是本发明的实验数据以色素沉着动物模型研究与评价本发明的应用效果。对成年雌性棕黄色豚鼠背部剃毛后进行UVB照射，首次照射亚红斑量，以后隔日照射I次五分之一亚红斑量，共照射6次总量为8500mj/cm2，以诱导色素沉着。于第2次照射开始，每天向实验动物背部皮肤的相应区域分别外涂本发明美白祛斑换肤凝胶，以进行干预治疗。3周后进行评价肉眼观察豚鼠皮肤红斑、鳞屑及色素沉着情况并进行计分。结果表明，本发明对UVB照射诱导豚鼠皮肤色素沉着具有明显的抑制作用。体外培养正常表皮黑素细胞，将传代黑素细胞计数按种于6个培养瓶中，确保每瓶细胞数相同，另设I瓶为空白对照组。6个培养瓶中分别加入本发明美白祛斑换肤液100 μ 1，200 μ 1,400 μ 1,600 μ 1,800 μ 1,1000 μ 1，培养 3 天。消化细胞，重新按种于 96 孔板(每孔细胞数2 X IO3)。采用氢氧化钠溶解法测定细胞黑素含量,每孔加入100 μ I ImoI/L的氢氧化钠，37°C保温I小时，测其在450nm处的吸光度值，绘制黑素标准曲线，计算黑素含量。结果表明(见表1)，与空白对照组相比，本发明美白祛斑换肤液可使黑素细胞内黑素含量明显降低。说明本发明具有抑制黑色素生成的作用。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色测定细胞增殖活力，将细胞接种于96孔板(每孔细胞数为2X IO3)，仍用上述6种药物剂量培养3天后，吸出培养液，于每孔加入MTT溶液100 μ I于37°C反应4小时，弃去MTT，每孔加入100 μ I DMSO并振荡10分钟，充分溶解结晶物，490nm处测定吸光度A值，实验结果用细胞增殖率表示(实验组A值/对照组A值X100)。结果表明(见表2)，与空白对照组相比，本发明美白祛斑换肤液可使黑素细胞增殖率明显降低。说明本发明具有抑制黑素细胞增生的作用。以L-Dopa为底物，采用体外氧化多巴反应方法测定黑素细胞酪氨酸酶活性。将细胞接种于96孔板(每孔细胞数为2 X IO3)，仍用上述6种药物剂量培养72小时后，收集细胞，离心弃去上清液，用O. 01mol/L的PBS洗2次，加入200 μ L0. I % TritonX-IOO裂解液，置于-80°C冰箱中O. 5小时，37°C水浴箱中复温O. 5小时，加2mg/mL L_Dopa400 μ L，继续37°C孵育2小时，分光光度计读取450nm处吸光度A值，用L-Dopa的自动氧化进行校正。重复3次。实验结果用酪氨酸酶活性(％ )=实验组A值/对照组A值X100%表示。结果表明(见表3)，与空白对照组相比，本发明美白祛斑换肤液对黑素细胞酪氨酸酶活性具有显著的抑制作用，从而抑制黑素细胞内黑色素的生成。表I.对黑素细胞内黑素含量的影响
权利要求
1.一种具有美白祛斑换肤作用的组合物，其特征在于由从银杏叶中提取的银杏黄酮粉末、从芝麻柏中提取的芝麻素粉末和从黄芪中提取的黄芪总苷粉末按质量比1-10 1-10 1-10混合均匀组成； 所述银杏黄酮粉末由银杏叶中提取，其中银杏黄酮含量大于50% ； 所述芝麻素粉末由芝麻柏中提取，其中芝麻素含量大于50% ； 所述黄芪总苷粉末由黄芪中提取，其中黄芪总苷含量大于50%。
2.根据权利要求I所述的一种具有美白祛斑换肤作用的组合物，其特征在于由银杏黄酮粉末、芝麻素粉末和黄芪总苷粉末按质量比I : I : I混合均匀组成。
3.根据权利要求I所述的一种具有美白祛斑换肤作用的组合物，可与化妆制剂或药物的赋形剂混合制成皮肤外用制剂，如膏霜乳液、凝胶、贴膜、皮下注射剂等。
全文摘要
本发明涉及一种具有美白祛斑换肤作用的组合物。该组合物由从银杏叶中提取的银杏黄酮粉末、从芝麻粕中提取的芝麻素粉末和从黄芪中提取的黄芪总苷粉末按质量比1-10∶1-10∶1-10混合均匀组成。该组合物可与化妆制剂或药物的赋形剂混合制成皮肤外用制剂，如膏霜乳液、凝胶、贴膜、皮下注射剂等。药理试验研究表明，本发明具有抑制皮肤酪氨酸酶活性和黑色素生成的作用。临床试用表明，本发明对面色暗黄、面部色斑人群具有显著的美白祛斑换肤效果，有效率达100％，使用安全无副作用。
文档编号A61P17/00GK102846499SQ201210292069
公开日2013年1月2日 申请日期2012年8月14日 优先权日2012年8月14日
发明者雷红, 王青 申请人:王青
