是可以申请二次鉴定的。笔迹鉴定，是指对人通过书写活动形成的字迹进行的鉴认、识别活动。人的书写习惯具有特定性和稳定性，并在笔迹中得到反映。通过对笔迹的检验，可判明文件中的笔迹由几个人所写，是否由某人所写，利用笔迹进行人身同一认定，证实文件的真伪。笔迹鉴定的结果具有绝对的法律效力。
笔迹鉴定不服可重新鉴定，笔迹鉴定法院程序违法是可以申请重新鉴定的，有下列情形之一的，司法鉴定机构可以接受委托进行重新鉴定：
(三)原司法鉴定人按规定应当回避没有回避的;
(四)委托人或者其他诉讼当事人对原鉴定意见有异议，并能提出合法依据和合理理由的;
(五)法律规定或者人民法院认为需要重新鉴定的其他情形。
1、笔迹鉴定从申请后一般需要1个月左右的时间，如果案情复杂的时间会长一些。当事人可以就查明事实的专门性问题向人民法院申请鉴定 。
2、当事人对鉴定意见有异议或者人民法院认为鉴定人有必要出庭的，鉴定人应当出庭作证。经人民法院通知，鉴定人拒不出庭作证的，鉴定意见不得作为认定事实的根据;支付鉴定费用的当事人可以要求返还鉴定费用。
3、一审审限一般6个月。人民法院适用普通程序审理一审民事案件的审限为6个月，有特殊情况需要延长的，由本院院长批准，可以延长6个月;还需要延长的，报请上级法院批准; 适用简易程序审理案件的审限为3个月，不能延长，若3个月内不能审结，转为普通程序继续审理。
4、人民法院适用普通程序审理的案件，应当在立案之日起六个月内审结。有特殊情况需要延长的，由本院院长批准，可以延长六个月;还需要延长的，报请上级人民法院批准。
5、人民法院适用简易程序审理案件，应当在立案之日起三个月内审结。
在我国当代的社会和生活中司法鉴定是非常的重要的一个环节，因为在很多的民事诉讼当中都是需要利用笔迹鉴定来进行确定是否是当事人的亲笔签名或者亲笔的字迹。如果参与鉴定的双方对于笔迹鉴定的结果不满意的话，或者是存在程序违法等现象的，是可以申请重新鉴定的。
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